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乳糖酶是由前乳糖酶原經過一系列步驟生成的：

前乳糖酶原由4個部分組成，即氨基末端的信號肽域、胞外域、疏水的跨膜錨定區、羧基末端的胞內段，在信號肽引導下經過內質網一系列修飾后進入高爾基體后被O糖基化，然后經歷細胞內和腸腔的2次裂解形成成熟的乳糖酶。

乳糖酶的半乳糖苷的轉移作用

半乳糖在乳糖酶的轉糖苷作用下生成低聚半乳糖，利用該技術可以生產低聚半乳糖，目前低聚半乳糖已經投放市場。低聚半乳糖不能被人體所吸收，但能夠被內的雙歧桿菌等益生菌所利用，促進益生菌的增殖，是很好的益生元，又稱為雙歧因子，低聚半乳糖是母乳來源的益生元。