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發酵法

發酵法的主要途徑是糖在乳酸菌作用下，調節pH值5左右，保持大約50～60dm；發酵3～5天得粗乳酸。

發酵法的原料一般是玉米、大米、甘薯等淀粉質原料（也有以苜蓿、纖維素等作原料，有研究提出廚房垃圾及魚體廢料循環利用生產乳酸的）。乳酸發酵階段能夠產酸的乳酸菌很多，但產酸質量較高的卻不多，主要是根霉菌和乳酸桿菌等菌系。不同菌系其發酵途徑不同，可分同型發酵和異型發酵，實際由于存在微生物其它生理活動，可能不是單純某一種發酵途徑。

發酵法分同型發酵和異型發酵。

合成法

合成方法制備乳酸有乳腈法、丙烯腈法、丙酸法、丙烯法等，用于工業生產的僅乳腈法(也叫乙醛氫氰酸法)和丙烯腈法。

（1）乳腈法

乳腈法是將乙醛和冷的氫氰酸連續送入反應器生成乳腈（或直接用乳腈作原料），用泵將乳腈打入水解釜，注入硫酸和水，使乳腈水解得到粗乳酸。然后再將粗乳酸送入酯化釜，加入乙醇酯化，經精餾、濃縮、分解得精乳酸。美國斯特林化學公司及日本的武藏野化學公司均采用此法合成乳酸。

（2）丙烯腈法

丙烯腈法是將丙烯腈和硫酸送入反應器中水解，再把水解物送入酯化反應器中與甲醇反應；然后把硫酸氫銨分出后，粗酯送入蒸餾塔，塔底獲精酯；再將精酯送入第二蒸餾塔，加熱分解，塔底得稀乳酸，經真空濃縮得產品。

（3）丙酸法

丙酸法以丙酸為原料，經過氯化、水解得粗乳酸；再經酯化、精餾、水解得產品。該法原料價格較貴，僅日本大賽路公司等少數廠家采用。

CH3CH2COOH →CH3CHClCOOH→CH3CH(OH)COOH

酶化法

（1）氯丙酸酶法轉化

東京大學的本崎等研究利用純化了的L-2-鹵代酸脫鹵酶和DL-2-鹵代酸脫鹵酶分別作用于底物L-2-氯丙酸和DL-2-氯丙酸，脫鹵制得L-乳酸或D-乳酸。L-2-鹵代酸脫鹵酶催化L-2-氯丙酸，而DL-2-鹵代酸脫鹵酶既可催化L-2-氯丙酸，又可催化L-2-氯丙酸生成相應的旋光體，催化同時發生構型轉化。

（2）丙酮酸酶法轉化

從活力的乳酸脫氫酶的混亂乳桿菌DSM20196菌體中得到D-乳酸脫氫酶，以無旋光性的丙酮酸為底物可得到D-乳酸。

工業生產乳酸方法主要是發酵法和合成法。發酵法因其工藝簡單，原料充足，發展較早而成為比較成熟的乳酸生產方法，約占乳酸生產的70以上，但周期長，只能間歇或半連續化生產，且國內發酵乳酸質量達不到國際標準。化學法可實現乳酸的大規模連續化生產，且合成乳酸也已得到美國食品和藥品管理局（FDA）的認可，但原料一般具有毒性，不符合綠色化學要求。酶法工藝復雜，其工業應用還有待于進一步研究。